Quasar 670

特点和优点：

• 简便-方案精简，直接验证 DNA 提取和确定是否存在qPCR检测抑制

仪器兼容性：

DNA 提取对照适用于商用硅膜DNA提取试剂盒，并已在多种实时PCR平台上得到验证测试。

该产品使用了为实现多重实时PCR反应而优化的CAL Fluor或Quasar染料。

产品说明：

qPCR 中的一种常见做法是在 DNA 提取后加入已知量的加标对照 DNA，这可以监测PCR 抑制，

但作为提取对照没有价值。理想的做法是在 qPCR 之前使测试样品和内部对照接受相同的处理。

Bioline 开发了 DNA Extraction Control (DEC)，与加标对照相比，它可以更接近地模仿检测样品。

来自检测样品和 DEC 的基因材料通过常规提取方法同时提取，提取对照对于抑制和提取失败与

检测样品同样灵敏。

DEC 细胞具有已知浓度，含有内部对照 DNA 序列。该序列与任何生物都不具有已知的同源性，并

且重要的是对样品 DNA 检测的干扰最小。在提取 DNA 之前，将DEC细胞作为标准品加入到具有

目标样品的裂解缓冲液中。然后在扩增之前将对照混合液（包含引物和探针）加入到反应混合物中。

来自内部对照 DNA 的信号可证实提取步骤成功（图1）。DEC 还可监测 PCR 抑制剂的共纯化，以

免导致有偏差或错误的扩增模式。

图1 使用SensiMix SYBR® Kit.的宽动态范围

a) 模板经过10个数量级的连续稀释，获得人类GAPDH基因的扩增曲线。结果表明，该试剂盒即使在低拷贝数模板

的样本中也具有出色的重现性。

b) 溶解曲线中出现独峰显示产物特异性，没有引物二聚体生成，及时在低拷贝数模板的情况下也是如此。