外泌体提取试剂盒（血清）

本试剂盒采用独特的分离技术，可以快速从血清中获得大量完整的外泌体颗粒，适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量（qPCR）和高通量测序等应用。

【运输与保存】

4℃保存，12个月。

【注意事项】

1.  使用前请将外泌体抽提试剂充分混匀。

2.  产品只针对血清样本，不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提；如果需要进行细胞上清外泌体分离，请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。

3.  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【操作方法】

样品预处理

1.  收集新鲜的样品，置于冰上待用；若为冻存的样品，可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻，待完全融化后置于冰上待用。

2.  取1 mL血清/血液样品转移至离心管中，4℃，3000×g离心10 min，弃沉淀，并将上清转移至新的离心管中。

3.  将转移的上清，4℃，10,000×g离心20 min，弃沉淀，将上清液转移至新的离心管中。

外泌体分离

1.  向预处理后的样品中，加入4倍体积的1×PBS充分混匀。

2.  在PBS稀释后的样品中，继续加入相应量的试剂；盖紧离心管盖，涡旋振荡1 min，放置于4℃冰箱静置2 h。

3.  取出装有混合液的离心管，4℃，10,000×g离心60 min，弃上清（尽可能吸净上清液），收集富含外泌体的沉淀。

4.  吸取一定量体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物，待其充分悬浮于PBS后，将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。

【注】加入PBS的量，建议根据初始样本的体积决定，初始样本体积：1×PBS体积=2.5:1。

5.  将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃，12,000×g离心2 min，弃沉淀，保留上清液，该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。

【注】此时如果依然可以看到明显的沉淀，建议重复步骤4，重新进行洗涤和沉淀。

6.  纯化后的外泌体可于4℃保存3天，-80℃ 长期保存，建议对外泌体进行分装后保存，避免反复冻融。