外泌体提取试剂盒(细胞上清)

filler

Catalog No. 规格 价格库存数量
I0007-50 50mL ¥3,000
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详情描述

运输与保存

4℃,保存12个月。

操作方法

一、     样品预处理

1.  取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上。

2.  样品初始用量:(细胞培养上清液20mL

3.  离心去细胞碎片:将样品转移至离心管中,于4℃以3000 g离心10 min,去除样品中的细胞碎片。

4.  上清液转移:去除细胞碎片的离心上清液转移到新的离心管中。

二、     提取外泌体

1.  上清液预处理:在去除杂质的离心上清液中加入Exosomoe Concentration SolutionECS 试剂),具体的加入剂量如下:

样品名称

样品剂量

加入ECS剂量

细胞培养上清液

20mL

5mL

 

2.  溶液混合:加入 ECS试剂后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀 1 min,再放置于2-8℃静置2 h

3.  沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管于 4℃以10000g离心60min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒。

4.  外泌体重悬:取100μL 1×PBS 均匀吹打离心沉淀物,待其均匀悬浮在PBS中后,将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中。

5.  收获外泌体颗粒:将含有重悬液的 1.5 mL离心管于4℃ 以12000 g离心2 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。

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